https://wiki.unissula.ac.id/index.php?action=history&feed=atom&title=Uji_difusi_cakramUji difusi cakram - Riwayat revisi2026-09-16T06:08:07ZRiwayat revisi halaman ini di wikiMediaWiki 1.46.0https://wiki.unissula.ac.id/index.php?title=Uji_difusi_cakram&diff=21737&oldid=prevMaintenance script: Presentation V4: sitasi, referensi, Math, Wikimedia Commons, dan atribusi2026-08-28T08:56:53Z<p>Presentation V4: sitasi, referensi, Math, Wikimedia Commons, dan atribusi</p>
<a href="https://wiki.unissula.ac.id/index.php?title=Uji_difusi_cakram&diff=21737&oldid=21337">Lihat perubahan</a>Maintenance scripthttps://wiki.unissula.ac.id/index.php?title=Uji_difusi_cakram&diff=21337&oldid=prevMaintenance script: Impor teks terkontrol dari Wikipedia bahasa Indonesia; revisi 29592316; atribusi sumber disertakan.2026-08-28T08:18:00Z<p>Impor teks terkontrol dari Wikipedia bahasa Indonesia; revisi 29592316; atribusi sumber disertakan.</p>
<p><b>Halaman baru</b></p><div>'''Uji difusi cakram''' (juga dikenal sebagai '''uji difusi agar''', '''uji Kirby–Bauer''', '''uji kerentanan antibiotik difusi cakram''', '''uji sensitivitas antibiotik difusi cakram''', dan '''uji KB''') adalah [[kultur mikrobiologi|uji mikrobiologi berbasis kultur]] yang digunakan dalam laboratorium [[diagnosis|diagnostik]] dan penemuan obat. Dalam laboratorium diagnostik, uji ini digunakan untuk menentukan kerentanan bakteri yang diisolasi dari [[infeksi]] pasien terhadap antibiotik yang disetujui secara klinis. Hal ini memungkinkan dokter untuk meresepkan pengobatan antibiotik yang paling tepat. Dalam laboratorium penemuan obat (terutama laboratorium [[bioprospeksi]]) uji ini digunakan untuk menyaring bahan biologis (misalnya ekstrak tumbuhan, kaldu fermentasi bakteri) dan kandidat obat untuk aktivitas antibakteri. Dalam bioprospeksi, pengujian dapat dilakukan dengan galur bakteri berpasangan untuk mencapai dereplikasi dan mengidentifikasi sementara mekanisme kerja antibakteri.<br />
<br />
Di laboratorium diagnostik, uji ini dilakukan dengan menginokulasi permukaan pelat agar dengan bakteri yang diisolasi dari infeksi pasien. Cakram kertas yang mengandung [[antibiotik]] kemudian dioleskan ke agar dan pelat diinkubasi. Jika antibiotik [[bakteriostatik|menghentikan pertumbuhan bakteri]] atau [[bakterisida|membunuh bakteri]], akan ada area di sekitar cakram tempat bakteri belum cukup tumbuh untuk terlihat. Ini disebut "zona penghambatan". Kerentanan isolat bakteri terhadap setiap antibiotik kemudian dapat dikuantifikasi secara semi-kuantifikasi dengan membandingkan ukuran zona penghambatan ini dengan [[pangkalan data]] informasi tentang bakteri yang diketahui rentan terhadap antibiotik, cukup rentan, dan resisten. Dengan cara ini, dimungkinkan untuk mengidentifikasi antibiotik yang paling tepat untuk mengobati infeksi pasien. Meskipun uji difusi cakram tidak dapat digunakan untuk membedakan aktivitas [[bakteriostatik]] dan [[bakterisida]], uji ini lebih praktis daripada metode uji kerentanan lainnya seperti pengenceran kaldu.<br />
<br />
Di laboratorium penemuan obat, uji difusi cakram dilakukan sedikit berbeda dibandingkan di laboratorium diagnostik. Dalam pengaturan ini, bukan galur bakteri yang harus dikarakterisasi, tetapi ekstrak uji (misalnya ekstrak tumbuhan atau mikroba). Oleh karena itu, pelat agar diinokulasi dengan galur bakteri dengan fenotipe yang diketahui (seringkali galur ATCC atau NCTC), dan cakram yang berisi ekstrak uji diaplikasikan ke permukaan (lihat di bawah). Ukuran zona hambatan tidak dapat digunakan sebagai ukuran semi-kuantitatif potensi antibakteri karena ekstrak yang berbeda mengandung molekul dengan karakteristik difusi yang berbeda (ukuran [[molekul]], [[hidrofilik|hidrofilisitas]], dll. yang berbeda). Ukuran zona hambatan dapat digunakan untuk tujuan dereplikasi. Ini dicapai dengan menguji setiap ekstrak terhadap galur bakteri yang berpasangan (misalnya galur yang rentan dan resisten terhadap [[streptomisin]] untuk mengidentifikasi ekstrak yang mengandung streptomisin). Galur berpasangan (misalnya tipe liar dan galur [[target biologis|target]] yang mengekspresikan secara berlebihan) juga dapat digunakan untuk mengidentifikasi mekanisme aksi [[antibiotik|antibakteri]].<br />
<br />
==Sejarah==<br />
Difusi agar pertama kali digunakan oleh [[Martinus Beijerinck]] pada tahun 1889 untuk mempelajari efek [[auksin]] pada pertumbuhan bakteri. Namun, metode ini telah dikembangkan, disempurnakan, dan distandarisasi oleh banyak ilmuwan dan organisasi ilmiah selama bertahun-tahun termasuk George F. Reddish, Norman Heatley, James G. Vincent, Alfred W. Bauer, William M.M. Kirby, John C. Sherris, Hans Martin Ericsson, [[Organisasi Kesehatan Dunia]], Institut Standar Klinis dan Laboratorium, Kelompok Referensi Swedia untuk Antibiotik, ''[[Deutsches Institut für Normung]]'', Masyarakat [[Britania Raya]] untuk Kemoterapi Antimikroba, dan lainnya.<br />
<br />
==Prinsip==<br />
Kultur bakteri murni disuspensikan dalam larutan garam, kekeruhannya distandarisasi, dan dioleskan secara merata pada pelat agar. Cakram kertas saring yang telah diresapi antibiotik atau [[ekstrak]] kemudian diletakkan pada permukaan agar. Konstituen cakram berdifusi dari kertas saring ke dalam agar. Konsentrasi konstituen ini akan paling tinggi di dekat cakram dan akan menurun seiring bertambahnya jarak dari cakram. Jika antibiotik atau ekstrak efektif melawan bakteri pada konsentrasi tertentu, tidak akan ada koloni yang tumbuh di tempat yang konsentrasinya dalam agar lebih besar atau sama dengan konsentrasi efektif. Ini adalah zona penghambatan. Secara umum, zona penghambatan yang lebih besar berkorelasi dengan [[konsentrasi hambat minimum]] (MIC) antibiotik atau ekstrak yang lebih rendah untuk galur bakteri tersebut. Pengecualian untuk hal ini adalah ketika molekul antibiotik atau ekstrak berukuran besar atau [[hidrofobik]] karena molekul-molekul ini berdifusi melalui agar secara perlahan.<br />
<br />
==Metode standar==<br />
<br />
<br />
===Cakram agar dan persiapan inokulum===<br />
Semua aspek prosedur Kirby–Bauer distandarisasi untuk memastikan hasil yang konsisten dan akurat. Oleh karena itu, laboratorium harus mematuhi standar ini. Media yang digunakan dalam uji Kirby–Bauer harus berupa agar Mueller–Hinton dengan kedalaman hanya 4 mm, dituangkan ke dalam [[cawan Petri]] berukuran 100 mm atau 150 mm. Tingkat [[pH]] agar harus antara 7,2 dan 7,4. Inokulum bakteri disiapkan dengan mengencerkan kultur kaldu agar sesuai dengan [[standar McFarland|standar kekeruhan McFarland]] 0,5; yang setara dengan sekitar 150 juta sel per mL.<br />
<br />
<br />
===Inokulasi dan Inkubasi===<br />
Menggunakan teknik [[aseptik]], [[kultur sel|kultur]] [[media tanam|kaldu]] organisme tertentu dikumpulkan dengan [[kapas pentol|kapas usap]] [[sterilisasi (mikrobiologi)|steril]]. Untuk bakteri [[Gram-negatif]], cairan berlebih dikeluarkan dari kapas usap dengan menekan atau memutarnya secara perlahan ke bagian dalam tabung. Kapas usap kemudian digoreskan pada cawan agar Mueller–Hinton untuk membentuk lapisan bakteri. Untuk mendapatkan pertumbuhan yang seragam, cawan agar digoreskan dengan kapas usap ke satu arah, diputar 120° dan digoreskan lagi, diputar 120° lagi dan digoreskan lagi. Menggunakan dispenser cakram antibiotik, cakram yang berisi antibiotik spesifik kemudian ditempelkan pada cawan. Ini harus dilakukan dalam waktu 15 menit setelah inokulasi. Pinset yang disterilkan dengan api digunakan untuk menekan setiap cakram secara perlahan ke agar dan memastikannya melekat. Cawan kemudian diinkubasi semalaman, biasanya pada suhu 35 °C. Cawan harus [[inkubator|diinkubasi]] dalam waktu 15 menit setelah penggunaan cakram antibiotik.<br />
<br />
===Modifikasi media uji===<br />
Bakteri tertentu memerlukan penambahan larutan 5% darah kuda yang didefibrinasi secara mekanis dan β-[[nikotinamida adenina dinukleotida|NAD]] (MH-F agar). Tabel berikut menunjukkan kebutuhan media mikroorganisme yang umum diuji:<br />
<br />
<br />
===Kontrol Kualitas===<br />
Untuk memastikan keakuratan hasil uji, metode [[pengendalian mutu|kontrol kualitas]] harus digunakan. Untuk memantau kinerja uji, galur bakteri khusus digunakan sebagai kontrol positif atau negatif. Ketika efikasi [[laktamase beta|β-laktamase]] diuji, galur khusus yang menunjukkan resistensi terhadap β-laktam digunakan. Selain itu, media spesifik digunakan untuk menguji antibiotik tertentu. Misalnya, ketika menguji kerentanan [[kotrimoksazol]], media dengan [[timina]] dan [[timidina]] berlebih direkomendasikan. Tabel berikut mencantumkan galur kontrol kualitas yang umum digunakan dalam metode difusi cakram:<br />
<br />
<br />
==Metode alternatif==<br />
Beberapa variasi metode difusi cakram telah dikembangkan, termasuk metode cawan [[penisilin]] Oxford dan ''Etest'' yang digunakan di laboratorium diagnostik rumah sakit, serta metode difusi sumur, difusi silinder, dan bioautografi yang digunakan di laboratorium penemuan dan pengembangan obat.<br />
<br />
===Metode cawan penisilin Oxford===<br />
Cakram berisi konsentrasi antibiotik yang meningkat ditempatkan pada media bakteri yang telah disemai pada permukaan agar dan lempeng diinkubasi. Ukuran zona diukur dari tepi cakram hingga ujung zona bening. Interpretasi lebih rumit pada populasi kerentanan campuran. Ukuran zona di-plot sebagai dimensi linier atau kuadrat jarak sebagai fungsi logaritma natural konsentrasi antibiotik dalam cakram. MIC ditentukan dari titik nol intersep regresi linier yang sesuai dengan data. Titik intersep itu sendiri merupakan logaritma dari MIC. Kemiringan garis regresi berkaitan dengan koefisien difusi antibiotik tertentu dalam agar.<br />
<br />
===Uji Kerentanan Antibiotik Cepat EUCAST (RAST)===<br />
Metode RAST berfungsi sebagai cara cepat untuk memastikan kerentanan antibiotik dan diciptakan sebagai modifikasi dari uji difusi cakram klasik. Metode ini memungkinkan untuk mempersingkat waktu inkubasi menjadi 16-20 jam. Skor uji dibaca setelah 4, 6, 8, dan 16-20 jam. Dibandingkan dengan metode standar, RAST tidak menghasilkan zona hambat yang jelas dalam rentang waktu sesingkat itu (semua bakteri kecuali ''S. pneumoniae'' memiliki peluang lebih tinggi dari 90% untuk dapat dibaca setelah 6 jam). Untuk galur kontrol kualitas, galur tersebut diencerkan 1:1.000.000 dan darah kuda atau domba yang telah didefibrinasi ditambahkan. Tabel titik henti RAST khusus harus digunakan saat menginterpretasikan hasil karena perbedaan kalibrasi metode.<br />
<br />
Galur kendali mutu yang tervalidasi meliputi: ''E. coli'' ATCC 25922, ''P. aeruginosa'' ATCC 27853, ''S. aureus'' ATCC 29213, ''E. faecalis'' ATCC 29212, ''S. pneumoniae'' ATCC 49619.<br />
<br />
====Skrining mekanisme resistensi antibiotik dalam RAST====<br />
RAST memungkinkan penentuan cepat kemungkinan resistensi antibiotik dalam kultur yang diuji. RAST memungkinkan pemeriksaan ''E. coli'' dan ''K. pneumoniae'' penghasil ESBL dan/atau karbapenemase, masing-masing menggunakan sefotaksim/seftazidim (setelah 4 jam) dan [[meropenem]] (setelah 6 jam). Namun, hasil ini tidak kuantitatif dan hanya boleh digunakan untuk skrining dalam tes medis rutin. Dalam [[uji klinis]], metode RAST menghasilkan peningkatan signifikan dalam memprediksi efikasi terapi antibiotik.<br />
<br />
===Metode pra-difusi cakram===<br />
Cakram berisi antibiotik ditempatkan pada cawan agar Mueller-Hinton yang belum diinokulasi dan diinkubasi selama 2 jam. Kemudian, cakram tersebut dikeluarkan dan suspensi bakteri yang sebelumnya disiapkan menggunakan mikrodilusi kaldu diaplikasikan dan cakram lain dengan antibiotik yang berbeda ditempatkan tepat di tempat yang sama dengan cakram sebelumnya. Setelah inkubasi selama 16-20 jam, hasilnya dikorelasikan dengan nilai MIC antibiotik pertama. Contoh metode pra-difusi adalah pengujian efikasi seftazidim/avibaktam (cakram primer) secara ''[[in vitro]]'' dalam kaitannya dengan [[aztreonam]] (cakram sekunder).<br />
<br />
===Pengujian obat antijamur===<br />
Metode difusi cakram dapat digunakan untuk menguji kerentanan terhadap [[antijamur]].<br />
<br />
<br />
===Bioautografi===<br />
Dibandingkan dengan metode berbasis cakram klasik, bioautografi menggunakan [[kromatografi lapis tipis]] untuk memisahkan komponen-komponen dari campuran yang diuji. Kemudian, pelat KLT dapat diletakkan di atas agar yang telah diinokulasi dan dibiarkan berdifusi ke dalamnya (bioautografi kontak) atau ditutup dengan kaldu yang mengandung mikroba (bioautografi langsung). Kemudian, sampel diinkubasi dan zona penghambatan diukur. Sebagai alternatif, pelat KLT dapat ditutup dengan agar cair dalam bioautografi lapisan agar.<br />
<br />
Untuk memvisualisasikan zona penghambatan dalam bioautografi langsung, reagen yang mendeteksi aktivitas dehidrogenase digunakan (misalnya garam tetrazolium, yang diubah oleh dehidrogenase mikroba menjadi [[formazan]] kromogenik).<br />
<br />
==Gambar lainnya==<br />
<br />
<br />
== Catatan ==<br />
<br />
<br />
==Referensi==<br />
<br />
<br />
<br />
== Sumber dan atribusi ==<br />
<br />
Konten artikel ini diadaptasi dari [https://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Uji+difusi+cakram&oldid=29592316 Wikipedia bahasa Indonesia], revisi 29592316 (2026-08-17T13:22:14Z), yang tersedia berdasarkan lisensi Creative Commons Atribusi-BerbagiSerupa (CC BY-SA). Mohon gunakan konten ini secara bijak serta sesuai dengan ketentuan lisensi yang berlaku.</div>Maintenance script